PCR實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)污染的原因是什么

PCR實(shí)驗(yàn)室也稱為基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。它利用分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)核酸片段進(jìn)行擴(kuò)增，也可視為一種特殊的核酸體外復(fù)制。利用基因追蹤系統(tǒng)掌握人體內(nèi)含量，檢測(cè)精度可達(dá)納米級(jí)?，F(xiàn)在PCR技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于傳染病、腫瘤靶向、生殖遺傳學(xué)等領(lǐng)域，但由于該技術(shù)對(duì)待測(cè)核酸進(jìn)行了多次大量的檢測(cè)，即使是少量的污染也很容易造成假陽(yáng)性結(jié)果。其次，PCR實(shí)驗(yàn)室要求比較高，實(shí)驗(yàn)過(guò)程復(fù)雜。如果中間環(huán)節(jié)有疏漏，可能會(huì)造成假陰性結(jié)果。

PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程當(dāng)中容易發(fā)生污染。造成污染的主要原因有四個(gè)：

1、PCR產(chǎn)物的污染。這也是PCR實(shí)驗(yàn)室普遍的污染原因。PCR產(chǎn)物重復(fù)擴(kuò)增后，復(fù)制量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于PCR的檢測(cè)限，因此即使是少量的污染也足以造成假陽(yáng)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

2、試劑污染。在制備試劑過(guò)程當(dāng)中，試劑因接觸受污染的容器、移液管、移液器吸頭、溶液等而受到污染。

3、待測(cè)樣品被污染。放置樣品的容器被污染或由于容器密封不嚴(yán)造成樣品與外界接觸被污染；其次，在核酸提取過(guò)程當(dāng)中使用了被污染的移液器或移液器吸頭，造成PCR實(shí)驗(yàn)室被污染；另外，有些樣品含有雜質(zhì)，如果散布在空氣中，可能會(huì)形成交叉污染。

4、氣溶膠污染。如果氣溶膠中含有病毒和其他污染物擴(kuò)散到空氣中，則很可能會(huì)污染PCR實(shí)驗(yàn)室。氣溶膠是由空氣和液體表層之間的摩擦產(chǎn)生的。打開(kāi)蓋子、搖晃反應(yīng)管、反復(fù)吸入污染進(jìn)樣器的樣品會(huì)形成氣溶膠并引起交叉污染。據(jù)計(jì)算，一個(gè)氣溶膠粒子可以包含48,000個(gè)副本。因此，應(yīng)特別注意氣溶膠造成的污染問(wèn)題。

只要PCR實(shí)驗(yàn)室受到污染，之前的結(jié)果報(bào)告就會(huì)失效，其他的實(shí)驗(yàn)操作就無(wú)法進(jìn)行。因此需要找到污染源并徹底清除，才能獲得準(zhǔn)確有效的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。