文章摘要: PCR實(shí)驗(yàn)室也稱為基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈反應(yīng)的簡稱。它是一種用于擴(kuò)增特定DNA的片段的分子生物學(xué)技術(shù),可視為體外特殊的DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng),可以快速掌握患者體內(nèi)的雜質(zhì)含量,其精度高達(dá)納米級。下面來簡單了解一下PCR實(shí)驗(yàn)室的建立方式。1
PCR實(shí)驗(yàn)室也稱為基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈反應(yīng)的簡稱。它是一種用于擴(kuò)增特定DNA的片段的分子生物學(xué)技術(shù),可視為體外特殊的DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng),可以快速掌握患者體內(nèi)的雜質(zhì)含量,其精度高達(dá)納米級。下面來簡單了解一下PCR實(shí)驗(yàn)室的建立方式。
1、建立樣品制備區(qū)
該區(qū)域?qū)S糜跇悠分苽洹V苽浜筒僮骱怂崽崛≡噭r應(yīng)注意的事項(xiàng):
(1)PCR產(chǎn)物和有待擴(kuò)增序列的DNA 克隆不可在本室操作。
(2)將組織培養(yǎng)物、組織標(biāo)本和血清樣品帶入PCR實(shí)驗(yàn)室的樣品制備室進(jìn)行處理,根據(jù)應(yīng)用需要提取DNA或RNA。
(3)用于樣品處理的工具不可作為普通的分子克隆工具使用,也不可用于操作目標(biāo)序列。
(4)DNA樣本操作時應(yīng)有特殊保護(hù)或正壓活塞移液器,以避免吸樣時留下氣溶膠。
(5)大體積樣品應(yīng)使用單獨(dú)包裝的一次性移液器吸取。
(6)開管前應(yīng)短暫離心,以減少氣溶膠的產(chǎn)生,切不可強(qiáng)行倒塌,以免產(chǎn)生氣溶膠。
(7)在PCR實(shí)驗(yàn)室中要始終穿戴實(shí)驗(yàn)室工作服和手套。 應(yīng)經(jīng)常更換手套,尤其是在提取過程的每個步驟之間。 實(shí)驗(yàn)室外套應(yīng)專門用于樣品制備室并經(jīng)常清理。
2、樣品制備和RNA-PCR的額外步驟是RNA-PCR 需要額外的樣品操作,這增加了樣品之間污染的機(jī)會。為了避免這個問題,可以在PCR實(shí)驗(yàn)室的樣品制備區(qū)進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄步驟。
3、建立PCR實(shí)驗(yàn)室的前區(qū)
該區(qū)域?qū)S糜诟鞣N反應(yīng)的制備。PCR實(shí)驗(yàn)室前區(qū)需要保持清理,沒有克隆和樣品制備造成的污染。PCR實(shí)驗(yàn)室前區(qū)需要有試劑和準(zhǔn)備,特別是前PCR區(qū)專用的正壓活塞移液器。
對PCR實(shí)驗(yàn)室的簡單介紹
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