PCR實(shí)驗(yàn)室怎樣建立

PCR實(shí)驗(yàn)室又稱基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈反應(yīng)的簡稱。它是一種用于擴(kuò)增特定DNA的片段的分子生物學(xué)技術(shù)，可視為體外特殊的DNA復(fù)制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng)，可以快速掌握患者體內(nèi)雜質(zhì)含量，精度高達(dá)納米級。下面我們來簡單了解一下PCR實(shí)驗(yàn)室的建立。

1、建立樣品制備區(qū)

該區(qū)域?qū)Ｓ糜跇悠分苽洹Ｖ苽浜筒僮骱怂崽崛≡噭r的注意事項(xiàng)：

(1)PCR產(chǎn)物和有待擴(kuò)增序列的DNA克隆不可在本室操作。

(2)將組織培養(yǎng)物、組織標(biāo)本和血清樣品帶入PCR實(shí)驗(yàn)室的制樣室進(jìn)行處理，根據(jù)應(yīng)用需要提取DNA或RNA。

(3)用于樣品處理的工具不可作為普通的分子克隆工具使用，也不可用于操作目標(biāo)序列。

(4)處理DNA樣品時應(yīng)有專用保護(hù)裝置或正壓活塞移液器，避免吸樣時留下氣溶膠。

(5)大體積樣品應(yīng)使用單包裝一次性移液器吸取。

(6)開管前先短時間離心，以減少氣溶膠的產(chǎn)生，切不可強(qiáng)行倒塌，以免產(chǎn)生氣溶膠。

(7)在PCR實(shí)驗(yàn)室中始終穿著實(shí)驗(yàn)室工作服和手套。應(yīng)經(jīng)常更換手套，尤其是在提取過程的每個步驟之間。實(shí)驗(yàn)室外套應(yīng)專門用于樣品制備室并經(jīng)常清理。

2、樣品制備和RNA-PCR的額外步驟是RNA-PCR需要額外的樣品操作，這增加了樣品之間污染的機(jī)會。為了避免這個問題，可以在PCR實(shí)驗(yàn)室的樣品制備區(qū)進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄步驟。

3、建立PCR實(shí)驗(yàn)室前沿區(qū)域

該區(qū)域?qū)Ｓ糜诟鞣N反應(yīng)的制備。PCR實(shí)驗(yàn)室的前部區(qū)域需要保持清理，不受克隆和樣品制備造成的污染。PCR實(shí)驗(yàn)室前區(qū)需要試劑和制劑，尤其是PCR前區(qū)專用的正壓活塞移液器。